第六節(jié)　移植免疫檢測(cè)

一、ABO血型配型：（見本篇第二章第四節(jié)）。

二、HLA配型：位于第六號(hào)染色體的短臂6P21.31區(qū)，長(zhǎng)3600KB，根據(jù)功能和產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的不同，分成3組：經(jīng)典HLA基因、免疫功能相關(guān)基因和免疫無(wú)關(guān)基因。其中經(jīng)典HLA基因與輸血和移植急性排斥反應(yīng)密切關(guān)聯(lián)。因此，對(duì)于經(jīng)典的HLA基因進(jìn)行分型在臨床上有重要意義。人類的疾病和基因密切相關(guān)。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展像白血病、地中海貧血、腎衰等都能用最新的基因技術(shù)進(jìn)行分型檢測(cè)，再尋找合適的供體進(jìn)行移植治療。

（一）HLA共分為4型：

Ⅰ型分子包括HLA-A、HLA-B和HLA-C，廣泛存在與各種組織細(xì)胞中；

Ⅱ型分子包括HLA-DP、HLA-DQ和HLA-DR，存在于B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和活化T細(xì)胞中；

Ⅲ型分子為補(bǔ)體系統(tǒng)，包括C2和C4位點(diǎn)，存在于血清中；

Ⅳ型分子可能是一些分化抗原，只存在于淋巴細(xì)胞、某些細(xì)胞毒性T細(xì)胞和白細(xì)胞中。

（二）HLA低分辨分型：采用序列特異性引物擴(kuò)增HLA等位基因的特異性片段， 經(jīng)電泳分離，根據(jù)PCR結(jié)果的反應(yīng)格局具判斷被測(cè)標(biāo)本的HLA等位基因型，具有通量大、正確性好的特點(diǎn)。 反映了HLA抗原水平的等位基因類型，用于骨髓、器官移植組織配型的初篩。

（三）HLA高分辨分型：過(guò)去治療白血病通常是通過(guò)骨髓移植進(jìn)行的，由于必須在麻醉狀態(tài)下抽取骨髓捐獻(xiàn)者的部分骨髓，整個(gè)過(guò)程對(duì)捐獻(xiàn)者產(chǎn)生非常大的心理壓力�，F(xiàn)隨著科學(xué)進(jìn)步，只需抽取若干毫升靜脈血，分離出干細(xì)胞，再輸入患者體內(nèi)即可。首先抽取患者和捐獻(xiàn)者的靜脈血樣本，提取DNA，測(cè)出各自DNA堿基的順序，最后通過(guò)軟件比對(duì)分析得出HLA型別。HLA高分辨分型技術(shù)是世界衛(wèi)生組織認(rèn)定的HLA分型標(biāo)準(zhǔn)。分型的作用就是要找到排列一致的樣本，配型的精度決定了患者在術(shù)后的康復(fù)效果和生存質(zhì)量。決定治療成本的關(guān)鍵步驟是如何快速、準(zhǔn)確地找到與患者一致的干細(xì)胞。

三、淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗(yàn)：淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗(yàn)是指受體的血清與供體的淋巴細(xì)胞之間的配合試驗(yàn)，是臨床移植前必須檢查的項(xiàng)目。

淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗(yàn)<10%或?yàn)殛幮圆拍苁┬心I移植。如果受體以前曾經(jīng)接受過(guò)輸血、有過(guò)妊娠或接受過(guò)同種異體移植，很可能在其血清內(nèi)已產(chǎn)生抗淋巴細(xì)胞抗體，對(duì)人類白細(xì)胞抗原（HLA）敏感。此時(shí)，淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗(yàn)可為陽(yáng)性，器官移植術(shù)后將可能發(fā)生超急性排斥反應(yīng)。

將含有細(xì)胞毒抗體的受者血清與供者的淋巴細(xì)胞加入補(bǔ)體后一起培養(yǎng)。受者血清中含有對(duì)抗供者淋巴細(xì)胞抗原HLA的抗體時(shí)，則兩者結(jié)合后激活補(bǔ)體，損害供者淋巴細(xì)胞膜或引起細(xì)胞溶解。通過(guò)顯微鏡下觀察死亡的淋巴細(xì)胞數(shù)量，可了解供受者之間的組織相容性。一般要求死亡細(xì)胞少于15%。若高于15%，移植后可能出現(xiàn)超急性排斥反應(yīng)。